一、 每次使用后：即時(shí)清潔與滅菌，避免殘留污染

1. 殘液排空與初步?jīng)_洗

• 發(fā)酵結(jié)束后，先排空罐內(nèi)殘液、培養(yǎng)基和細(xì)胞碎片，用去離子水或純化水反復(fù)沖洗罐體內(nèi)壁、攪拌槳、擋板、取樣口等部位，去除肉眼可見的殘留。

• 對(duì)于動(dòng)物細(xì)胞專用的氣升式發(fā)酵罐（無攪拌槳，剪切力低），需重點(diǎn)沖洗氣液分布器的微孔，防止堵塞。

2. 化學(xué)清洗，去除頑固污漬

• 針對(duì)蛋白質(zhì)、多糖等難溶殘留，配制堿性清洗劑（如 0.5%–1% NaOH 溶液），注入罐內(nèi)至浸沒所有接觸部位，循環(huán)清洗 30–60min；若殘留較多，可適當(dāng)加熱至 40–50℃（避免高溫?fù)p傷密封件）。

• 若有鈣鎂沉淀或無機(jī)物殘留，先用酸性清洗劑（如 0.1%–0.5% 稀硝酸）循環(huán)清洗 20–30min，之后用大量純化水沖洗至中性（pH 6.5–7.5），防止酸堿殘留損傷細(xì)胞。

• 注意：動(dòng)植物細(xì)胞發(fā)酵罐的硅膠管、橡膠密封墊等部件，不可長(zhǎng)時(shí)間接觸強(qiáng)酸強(qiáng)堿，清洗后需及時(shí)取出單獨(dú)處理。

3. 滅菌，杜絕雜菌滋生

• 在位滅菌（SIP）：優(yōu)先采用高溫蒸汽滅菌，參數(shù)為 121℃、0.1MPa、20–30min，覆蓋罐體、管路、閥門、傳感器探頭等所有與培養(yǎng)基接觸的部件；對(duì)于不耐高溫的部件（如 pH 電極、溶氧電極），需拆卸后用75% 乙醇浸泡或紫外照射滅菌。

• 滅菌后處理：滅菌完成后，保持罐內(nèi)干燥，防止冷凝水滋生雜菌；若長(zhǎng)期不使用，可通入無菌空氣吹干罐內(nèi)。

二、 定期維護(hù)：核心部件的檢查與更換

1. 密封件與連接件維護(hù)

• 發(fā)酵罐的罐蓋密封圈、管路硅膠墊圈、閥門密封墊是易損件，需每月檢查一次，若出現(xiàn)老化、變形、開裂，立即更換，防止漏氣漏液和污染。

• 動(dòng)物細(xì)胞發(fā)酵罐的密封件建議選擇醫(yī)用級(jí)硅膠或氟橡膠，定期用醫(yī)用酒精消毒，避免材質(zhì)溶出物影響細(xì)胞生長(zhǎng)。

2. 攪拌與通氣系統(tǒng)維護(hù)

• 機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐：每季度檢查攪拌槳的軸承和減速電機(jī)，添加專用潤(rùn)滑油；檢查攪拌槳與軸的連接是否松動(dòng)，防止運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生剪切力損傷細(xì)胞。

• 通氣系統(tǒng)：定期拆洗空氣過濾器（濾芯材質(zhì)多為聚四氟乙烯或纖維素），若濾芯堵塞或滅菌次數(shù)過多，及時(shí)更換；氣升式發(fā)酵罐的曝氣頭微孔需用超聲波清洗，保證通氣均勻。

3. 傳感器與儀表校準(zhǔn)

• pH 電極、溶氧電極：每月校準(zhǔn)一次，pH 電極用標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（pH 4.0、7.0、10.0）校準(zhǔn)，溶氧電極用飽和亞硫酸鈉溶液（零氧點(diǎn)）和空氣（100% 溶氧點(diǎn)）校準(zhǔn)；使用前后需用保護(hù)液浸泡，防止電極干涸失效。

• 溫度傳感器、壓力傳感器：每季度校準(zhǔn)一次，確保溫度控制精度在 ±0.5℃內(nèi)，壓力顯示準(zhǔn)確。

三、 長(zhǎng)期停用保養(yǎng)：防潮防銹，延長(zhǎng)設(shè)備壽命

1. 若發(fā)酵罐長(zhǎng)期停用（超過 1 個(gè)月），需完成清潔 - 滅菌 - 干燥流程：

• 罐體內(nèi)壁、攪拌槳等金屬部件，涂抹一層食品級(jí)防銹油，防止生銹；

• 可拆卸部件（如電極、密封圈、過濾器）清洗滅菌后，密封存放于干燥、無塵的環(huán)境中。

2. 斷開發(fā)酵罐的電源和氣源，關(guān)閉所有閥門，做好防塵罩防護(hù)；定期（每月）通電運(yùn)行 10–15min，檢查電機(jī)和控制系統(tǒng)是否正常。

四、 保養(yǎng)注意事項(xiàng)

1. 動(dòng)植物細(xì)胞發(fā)酵罐的保養(yǎng)需區(qū)分材質(zhì)：玻璃罐體避免碰撞和溫差驟變；不銹鋼罐體不可用鋼絲球刷洗，防止刮傷內(nèi)壁滋生雜菌。

2. 清洗和滅菌時(shí)，避免腐蝕性試劑接觸傳感器和電氣部件；動(dòng)物細(xì)胞發(fā)酵罐嚴(yán)禁使用含氯消毒劑，防止殘留氯毒害細(xì)胞。

3. 建立保養(yǎng)臺(tái)賬，記錄每次清潔、滅菌、部件更換和校準(zhǔn)的時(shí)間，便于追溯。